蛋清蛋黄中13 种功能成分提取纯化技术:为获得高活性高产率溶菌酶,采用离子交换吸附与超滤结合、集成浓缩、低温喷雾等工艺,研究了离子交换树脂种类、用量、吸附反应时间、洗脱液浓度和洗脱时间等对溶菌酶提取效果的影响,将离子交换法制得的溶菌酶粗品用超滤法除盐,研究了超滤除盐过程中浓缩液体积、膜通量以及脱盐率的关系,进一步经超滤浓缩后低温喷雾干燥,溶菌酶得率91.6%,酶活力21500U/mg。设备简单,处理量可调,树脂易再生,大幅降低生产成本,条件温和,不需酸碱,不导致蛋白质结构性质的变化,生物活性保持良好。生产场地清洁卫生,满足GMP 生产规范,工艺先进,操作简便。 针对蛋黄为油溶性、免疫球蛋白(IgY)水溶性特点,采用低温水相萃取、提油,聚乙二醇沉淀、离子交换色谱结合超滤浓缩、亲和色谱纯化等,建立高活性高纯度鸡蛋IgY 分离提取方法,纯度95%以上,达药品级标准;活性保持率73.77%(国际上35%左右)。通过单甲氧基聚乙二醇(mPEG)对IgY 修饰改性,IgY 活性保持率提高到90%。工艺条件温和,无污染,成本低,生产周期短,节能减排显著。 蛋清5种蛋白质联合提取纯化技术:相继研发了卵白蛋白、卵转铁蛋白、卵粘蛋白、卵巨球蛋白、S-卵白蛋白、卵类粘蛋白、抗生物素蛋白、核黄素结合蛋白、卵黄高磷蛋白等分离纯化方法。以单功能成分分离纯化为基础,攻克了鸡蛋清5 种功能蛋白质联合提取共纯化技术与模式。本项目首先采用聚乙二醇将将蛋清分为四个组分,使卵粘蛋白、大部分的卵白蛋白与其他蛋清蛋白质分离开来,以提高后续层析分离的选择性;然后从蛋清组分一中纯化出卵粘蛋白,溶菌酶、卵白蛋白、卵转铁蛋白和卵黄素蛋白4 种蛋白质,通过Q Sepharose FF阴离子交换层析将4 种蛋白质分别纯化,实现了鸡蛋清中5 种功能蛋白质的联合纯化。 依托该技术已开发生产溶菌酶系列产品(粉状、喷雾剂、漱口水)、卵粘蛋白抗病毒制剂、蛋白补铁剂等系列产品,其中,卵转铁蛋白补铁剂使我国补铁食品由无机铁型、有机铁型、卟啉铁型发展到蛋白铁时代。
展开通过禽蛋单功能成分提取纯化技术及其基础研究,突破了鸡蛋中多种功能蛋白质联合提取共纯化技术。分别建立了溶菌酶、免疫球蛋白(IgY)、卵转铁蛋白、蛋黄卵磷脂(得到PC含16种分子结构)、卵白蛋白、卵粘蛋白、卵巨球蛋白、S-卵白蛋白、卵类粘蛋白、抗生物素蛋白、核黄素结合蛋白、卵黄高磷蛋白等13种单功能成分分离纯化方法。研究揭示了相应功能成分纯化方法、分子结构、功能活性的“构-效”“量-效”分子机制等基础内容。
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展开该成果授权发明专利4项,其中国家发明专利3项,美国专利1项(专利号:US 8574883B2、ZL 201210083362.2、ZL 201310073453.2、ZL 201410154251.5)。
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