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育种花卉组织培育过程中灭菌方法

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 花卉的组织培养是根据花卉细胞具有全能性这个理论,近年来发展起来的一项无性繁殖的新技术。花卉的组织培养广义又叫离体培养,指从花卉体分离出符合需要的组织、器官或细胞,原生质体等,通过无菌操作,在无菌条件下接种在含有各种营养物质及花卉激素的培养基上进行培养以获得再生的完整植株或生产具有经济价值的其他产品的技术

花卉组织培养微生物污染

微生物污染是花卉组织培养中普遍存在的问题。在花卉通过组织培养的快速繁殖过程中,培养基、接种器具、超净工作台、接种室等工作环境消毒不严格或无菌操作不规范等均可导致组织培养污染的发生。

另外,对于某些花卉本身生长于温暖多雨的环境,茎叶的表面及其组织内部均滋生有大量的表生及内生微生物,一些侵入表皮内薄壁组织的菌丝体以及部分内生微生物,不能被一般的表面消毒处理所清除,而随着组织材料进入培养过程,引起组培污染而导致组培失败。

花卉组织培养微生物污染途径

1、若污染菌类是零星分散在培养基中,则可确定是人为引起的污染:

比如培养基灭菌不彻底;超净工作台长时间不换滤网,致使净化能力降低;接种用具灭菌不彻底;操作不正确,动作生硬缓慢,开瓶时间太久,接种台摆放物品杂乱,操作中心在人体范围之内;接种室环境长期不灭菌,菌类太多等。

2、若污染菌类是从材料周围长起,则可证明是花卉材料带菌引起:

可能是接种用具灭菌不彻底,接种时材料被污染;或者是未及时发现污染苗,接种过程交叉感染等。

3、若菌类从材料培养基以上部分长起,而不是从培养基先长起:

且发生在5天以后,则说明是材料带的内生菌。若从培养基以下开始长菌,发生时间较早,且有从里向外的趋势,则说明是切口引起的污染,原因可能是灭完菌后,未剪去两个切口或虽剪但器具带菌。

   上述都严重影响了花卉组织培养的商业化生产。因此,研究花卉组培微生物污染的来源、种类及消毒方法与消毒剂的筛选,对降低污染微生物造成的危害,提高组织培养的成功率和培养物的成活率,降低生产成本,提高经济效益等均具有重要意义

解决方案

   用传统的消毒方式如抗生素、次氯酸钠、硝酸银、氯化汞等对花卉进行处理,这几种方式有的杀菌不彻底,有的对人体有害,有的引起盐害,有的还会影响花卉材料的正常生长分化。

   因此,寻找一款高效优质的消毒剂及配合专业的技术解决方案。才是花卉组培行业长期发展的方向。通过长期的应用实践证明,德国进口的奥克泰士杀菌消毒剂(食品级),配合我们独有的消毒方案和专业的技术人员,彻底解决花卉组培过程中的微生物污染问题。

奥克泰士

   Oxytech/奥克泰士来自德国,是多组分生态消毒杀菌剂,协同微动作用,过氧化氢与银结合形成强大的消毒杀菌与抑菌剂。(Shuval et al 1995, Batterman et al 2000, Pedahzur et al 2000)奥克泰士消毒剂能够杀灭革兰氏阳性菌、革兰氏阴性菌、细菌(包括细菌芽孢)、病毒、酵母菌、真菌和原生动物。奥克泰士消毒剂的作用经过270多项测试和验证(由国际知名检测机构、实验室和大学进行)。奥克泰士产品经过VAH(德国应用卫生协会)验证并注册。

自引进中国市场以来,取得了良好效果,解决了植物组培过程中微生物难以控制的难题,取得了巨大的经济效益和社会效益,使奥克泰士应用技术得到推广普及。


奥克泰士产品特点

1、奥克泰士用于花卉组织培养中花卉的微生物污染防治与清除,能广泛抑制和清除细菌和真菌的污染,并防止真菌孢子的萌发;

2、在合理的使用剂量下,奥克泰士是一种非常有效的花卉组培杀菌剂与保护剂,不会对花卉的生长(如种子萌发,愈伤增殖、再生等)产生任何影响,可视为培养基标准配方成份;

3、奥克泰士主要用于预防和消除来自空气、水源或者人体接触等外界因素导致的花卉组培过程中的微生物污染,同时,对于花卉内生菌也同样具有非常好的抑制效果;

4、没有毒性和残留,奥克泰士中的过氧化氢作用后完全分解成水和氧气,没有毒副产物。极其微量的银离子属于亲生物体金属,对人和植物均是有益成分,在生物体中也不会有蓄积。

5、奥克泰士具有稳定性,无需过滤灭菌,能直接加入培养基高温灭菌而不会影响使用效果,使用更加方便;

6、奥克泰士性价比更高,可更加广泛的应用于更多的科学研究、作物育种、组培苗工厂化生产中。

7、国内常用检测:

  • 杀菌效力检测(高效,高抗性枯草杆菌黑色变种芽孢ATCC9372的杀灭率>99.999%);

  • 无菌检测;

  • 经口毒性检测(实际无毒);

  • 红细胞微核检测(无致癌无致畸、无致微核作用);

  • 铅砷汞重金属含量检测(零检出);

  • 金属腐蚀性检测(基本无腐蚀)。

更多检测数据请咨询奥克泰士技术工程

8、欧盟和德国相关认证和检测:

  • DIN EN ISO 9001;

  • DIN EN ISO 14001;

  • IFS国际食品标准认证;

  • 欧盟EMAS生态认证;

  • 欧盟A.I.S.E.认证。



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